PCR - Hipertensión Arterial

1.- Tema: Regiones polimórficas del gen 11ß-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 1 (11ßHSD1) en hipertensión arterial esencial: Posible rol etiopatogénico

2.- Objetivo: Determinar la distribución y prevalencia de CA15, CA19 y INS A83557 en el HDS11B1 gen y correlacionar estos resultados con los parámetros bioquímicos en cortisol /ACTH (HPA) y el eje renina-angiotensina-aldosterona en pacientes con hipertensión esencial

3.- Muestra: Sangre periférica

4.- Tipo de ácido nucleico: ADN genómico a partir de leucocitos de sangre periférica

5.- Extracción de ADN

 Lisis          ]

Separación    ] Kit comercial DNA-zol

Purificación   ]

6.- Gen amplificado: HSD11B1

7.- PCR- Simple

Desnaturalización Inicial           94 C^o                    2min.

Desnaturalización                   94 C^o                30seg.]

Hibridación                          55C^o                 30seg ]        30 ciclos

Extensión                            72 C^o                30seg.]

Extensión final                      30 C^o                10min.

8.- Enzima de restricción: Xcml
9.- Visualización: EFO (Electroforesis)

Bibliografía: http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=s0034-98872008000600003&script=sci_arttext&tlng=en

Prueba de Tamizaje y Confirmatoria de Hipertensión Arterial

La Prueba de Tamizaje: consiste en el uso de una prueba sencilla en una población saludable, para identificar a aquellos individuos que tienen alguna patología, pero que todavía no presentan síntomas. 

En el caso de hipertensión arterial se puede mencionar:

Uso de esfingomanómetro: consiste en la medición de la tensión arterial, la cual se asemeja mucho a la medición intraarterial (coeficiente de correlación = 0.94- 0.98); es decir, es exacta. Sin embargo para garantizar la exactitud de la medición de la tensión arterial en la consulta, es necesario observar una excelente técnica durante su medición.

Prueba confirmatoria:

En el caso de que las cifras de Presión Arterial sean iguales o superiores a 140/90 mmHg, no se debe hacer el diagnóstico de HTA hasta haberlo confirmado en dos o más visitas posteriores. Se debe realizar dos o más lecturas separadas por 2 minutos.

M.A.P.A. Holter de tensión arterial: Prueba diagnóstica que permite el registro de las cifras de tensión arterial de forma continua durante un determinado período de tiempo preestablecido.

Existen otras pruebas para el diagnóstico:

·  Análisis de varios componentes de la orina para detectar enfermedad renal.

·  Exámenes de sangre para detectar niveles de potasio, sodio, colesterol, glucosa, triglicéridos fuera de lo normal.

·  Un electrocardiograma (ECG) de 12 derivaciones para determinar una isquemia miocárdica, defectos en la condición o hipertrofia del ventrículo izquierdo. 

Referencia bibliográfica

http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0718-85602010000100012&script=sci_arttext

http://www.uacj.mx/ICB/RedCIB/MaterialesDidacticos/Monografas/Pruebas%20de%20Tamiz.pdf

http://www.isssteags.gob.mx/guias_praticas_medicas/gpc/docs/IMSS-076-08-ER.pdf

http://www.diabetes.unal.edu.co/Guias_de_HIPERTENSION_ARTERIAL.pdf

Alteraciones en la Traducción en Hipertensión Arterial

Hay genes que codifican proteínas necesarias para regular la presión arterial, entre ellos se puede mencionar el gen WNK 1 que participan en el sistema renina-angiotensina. La enzima convertidora de angiotensina I (17q12), genes que codifican para el oxido nítrico sintasa endotelial (eNOS), factor de necrosis tumoral (TNF–α), interleucina-6 y el receptor de tipo I de la angiotensina II.

El gen SH2B3 codifica una proteína adaptadora de linfocitos; este SNP (polimorfismos de un sólo nucleótido) resultó asociado a presión diastólica, se encuentra en el exón tres y cambia al aminoácido arginina por triptófano (R262W) en la proteína. Debido a este cambio el gen SH2B3 regula negativamente la transducción de señales en células endoteliales, un tipo celular que juega un papel fundamental en la regulación de la presión sanguínea y aterosclerosis. 

Referencia bibliográfica:

http://www.scielo.org.mx/scielo.php?pid=S1405-99402011000300013&script=sci_arttext

Alteraciones en transcripción en la Hipertensión Arterial

Para HTA diastólica, la señal más fuerte fue en el polimorfismo de rs1378942 ubicado en el intrón de CSK (c-src tirosinquinasa) en 15q24. Un cambio de una guanina por adenina en la posición –6 de la región promotora del gen AGT, afecta el promedio de transcripción basal del gen AGT y está asociado en forma significativa con la presencia de hipertensión. La presencia de diferencias en la secuencia en la región central del promotor, altera la afinidad del promotor por factores de transcripción. Específicamente, las variantes genéticas en la posición –20 y –18 podían afectar la actividad transcripcional hasta 2,5 veces.

Referencia bibliográfica:

http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=s0120-56332006000200004&script=sci_arttext

http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-98872010000600016

http://bvs.sld.cu/revistas/ibi/vol32_1_13/ibi02113.htm

Alteraciones epigenómicas de la Hipertensión Arterial

El código epigenético está constituido por un sistema de moléculas unidas al complejo ADN/histonas, que a diferencia del inmutable código genético, es dinámico, flexible y modificable dependiendo de cambios químicos, que a su vez son influidos por factores ambientales. Estos mecanismos que silencian o activan genes permiten la "adaptación al entorno", convirtiéndose en uno de los procesos reguladores fundamentales para los seres vivos. Las alteraciones epigenéticas intervienen en numerosas enfermedades; la aterosclerosis, en donde la formación de la placa de ateroma se debe a una dieta rica en grasas y a la existencia de un patrón epigenético de expresión de genes relacionados con el metabolismo de las grasas. La aparente relación entre malnutrición materna, peso bajo de nacimiento y mayor probabilidad de presentar HTA en la edad adulta estaría condicionado por factores epigenéticos. 

Fuente bibliográfica:

http://www.scielo.org.pe/pdf/afm/v71n4/a04v71n4.pdf

http://www.scielo.org.co/pdf/rcca/v20n1/v20n1a6.pdf