domingo, 14 de junio de 2015

Ejemplo de recombinación de Ácidos Nucleicos en la naturaleza y un ejemplo de ADN recombinante en HTA

La recombinación genética es un proceso que conlleva a la obtención de un nuevo genotipo a través del intercambio de material genético entre secuencias homólogas de DNA de dos orígenes diferentes. 
En la naturaleza puede observarse recombinación genética tanto en procariotas como en eucariotas, por ejemplo:
En Procariotas
-Transformación (la bacteria acepta y recombina su genoma con ADN libre en el medio)
-Transducción (el ADN donador procede de un virus)
-Conjugación (en este caso el ADN donador lo aporta un plásmido)
En Eucariotas
-Recombinación homóloga (Profase I Meiosis)
-Entrecruzamiento cromosómico (Anafase I Meiosis)
-Recombinación no homóloga (células de mamíferos)
En los vertebrados también hay un tipo de recombinación genética especial en las células B y T del sistema inmune, llamada recombinación V(D)J, que es la responsable de generar la tremenda variabilidad de anticuerpos y de receptores de células T necesaria para la respuesta inmune.

ADN recombinante en HTA
Nesiritide (Natrecor) es un nuevo fármaco a base de BNP humano obtenido por tecnología DNA recombinante, con propiedades de vasodilatación, inotrópicas y de natriuresis. Produce un descenso en la resistencia vascular sistémica, presión arterial sistémica, presión arterial pulmonar media y capilar pulmonar, presión auricular derecha, aumento del volumen latido y gasto cardíaco, sin cambios asociados a la frecuencia, Asimismo, favorece la diuresis, debido a su acción natriurética directa y/o descenso de los niveles de aldosterona.
No necesita de monitorización invasiva y sus efectos más importantes son el alivio rápido de la disnea, el descenso de la presión capilar pulmonar y disminución de las presiones pulmonares a los 15 minutos de su administración endovenosa y no desarrolló tolerancia. Como efectos adversos pueden aparecer hipotensión leve, cefaleas y disfunción renal en individuos susceptibles.

domingo, 7 de junio de 2015

Pruebas moleculares para Hipertensión Arterial

El diagnóstico puede hacerse con el test de supresión con dexametasona o por la determinación de 18-hidroxicortisol por ELISA, que es más confiable para Aldosteronismo remediable con Glucocorticoides (GRA). La prueba por Southern Blot, permite detectar la presencia de una secuencia de ADN en una mezcla compleja de este ácido nucleico. Para ello, emplea la técnica de electroforesis en gel de agarosa con el fin de separar los fragmentos de ADN de acuerdo a su longitud y, después, una transferencia a una membrana en la cual se efectúa la hibridación de la sonda.
La Southern Blot es sensible y específico para (GRA) y debería realizarse en todo niño o adulto joven con HTA severa o resistente y una historia familiar positiva de HTA de inicio precoz o un accidente hemorrágico prematuro.
recombinant DNA
Referencia bibliográfica:

sábado, 30 de mayo de 2015

PCR - Hipertensión Arterial

1.- Tema: Regiones polimórficas del gen 11ß-hidroxiesteroide deshidrogenasa tipo 1 (11ßHSD1) en hipertensión arterial esencial: Posible rol etiopatogénico
2.- Objetivo: Determinar la distribución y prevalencia de CA15, CA19 y INS A83557 en el HDS11B1 gen y correlacionar estos resultados con los parámetros bioquímicos en cortisol /ACTH (HPA) y el eje renina-angiotensina-aldosterona en pacientes con hipertensión esencial
3.- Muestra: Sangre periférica
4.- Tipo de ácido nucleico: ADN genómico a partir de leucocitos de sangre periférica

5.- Extracción de ADN
 Lisis          ]
Separación    ] Kit comercial DNA-zol
Purificación   ]
6.- Gen amplificado: HSD11B1
7.- PCR- Simple
Desnaturalización Inicial           94 Co                    2min.

Desnaturalización                   94 Co                30seg.]
Hibridación                          55Co                 30seg ]        30 ciclos
Extensión                            72 Co                30seg.]
Extensión final                      30 Co                10min.
8.- Enzima de restricción: Xcml
9.- Visualización: EFO (Electroforesis)

domingo, 17 de mayo de 2015

Prueba de Tamizaje y Confirmatoria de Hipertensión Arterial

La Prueba de Tamizaje: consiste en el uso de una prueba sencilla en una población saludable, para identificar a aquellos individuos que tienen alguna patología, pero que todavía no presentan síntomas. 
En el caso de hipertensión arterial se puede mencionar:
Uso de esfingomanómetro: consiste en la medición de la tensión arterial, la cual se asemeja mucho a la medición intraarterial (coeficiente de correlación = 0.94- 0.98); es decir, es exacta. Sin embargo para garantizar la exactitud de la medición de la tensión arterial en la consulta, es necesario observar una excelente técnica durante su medición.
Prueba confirmatoria:
En el caso de que las cifras de Presión Arterial sean iguales o superiores a 140/90 mmHg, no se debe hacer el diagnóstico de HTA hasta haberlo confirmado en dos o más visitas posteriores. Se debe realizar dos o más lecturas separadas por 2 minutos.
M.A.P.A. Holter de tensión arterial: Prueba diagnóstica que permite el registro de las cifras de tensión arterial de forma continua durante un determinado período de tiempo preestablecido.
Existen otras pruebas para el diagnóstico:
·  Análisis de varios componentes de la orina para detectar enfermedad renal.
·  Exámenes de sangre para detectar niveles de potasio, sodio, colesterol, glucosa, triglicéridos fuera de lo normal.
·  Un electrocardiograma (ECG) de 12 derivaciones para determinar una isquemia miocárdica, defectos en la condición o hipertrofia del ventrículo izquierdo. 

Referencia bibliográfica

Alteraciones en la Traducción en Hipertensión Arterial

Hay genes que codifican proteínas necesarias para regular la presión arterial, entre ellos se puede mencionar el gen WNK 1 que participan en el sistema renina-angiotensina. La enzima convertidora de angiotensina I (17q12), genes que codifican para el oxido nítrico sintasa endotelial (eNOS), factor de necrosis tumoral (TNF–α), interleucina-6 y el receptor de tipo I de la angiotensina II.

El gen SH2B3 codifica una proteína adaptadora de linfocitos; este SNP (polimorfismos de un sólo nucleótido) resultó asociado a presión diastólica, se encuentra en el exón tres y cambia al aminoácido arginina por triptófano (R262W) en la proteína. Debido a este cambio el gen SH2B3 regula negativamente la transducción de señales en células endoteliales, un tipo celular que juega un papel fundamental en la regulación de la presión sanguínea y aterosclerosis. 

Referencia bibliográfica:

domingo, 10 de mayo de 2015

Alteraciones en transcripción en la Hipertensión Arterial

Para HTA diastólica, la señal más fuerte fue en el polimorfismo de rs1378942 ubicado en el intrón de CSK (c-src tirosinquinasa) en 15q24. Un cambio de una guanina por adenina en la posición –6 de la región promotora del gen AGT, afecta el promedio de transcripción basal del gen AGT y está asociado en forma significativa con la presencia de hipertensión. La presencia de diferencias en la secuencia en la región central del promotor, altera la afinidad del promotor por factores de transcripción. Específicamente, las variantes genéticas en la posición –20 y –18 podían afectar la actividad transcripcional hasta 2,5 veces.
Referencia bibliográfica:

viernes, 1 de mayo de 2015

Alteraciones epigenómicas de la Hipertensión Arterial

El código epigenético está constituido por un sistema de moléculas unidas al complejo ADN/histonas, que a diferencia del inmutable código genético, es dinámico, flexible y modificable dependiendo de cambios químicos, que a su vez son influidos por factores ambientales. Estos mecanismos que silencian o activan genes permiten la "adaptación al entorno", convirtiéndose en uno de los procesos reguladores fundamentales para los seres vivos. Las alteraciones epigenéticas intervienen en numerosas enfermedades; la aterosclerosis, en donde la formación de la placa de ateroma se debe a una dieta rica en grasas y a la existencia de un patrón epigenético de expresión de genes relacionados con el metabolismo de las grasas. La aparente relación entre malnutrición materna, peso bajo de nacimiento y mayor probabilidad de presentar HTA en la edad adulta estaría condicionado por factores epigenéticos. 
Fuente bibliográfica: